大鼠軟骨細胞分離自正常大鼠軟骨組織,軟骨細胞主要功能:軟骨是人身體中不會(huì )發(fā)生的組織;骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構成的;軟骨一般起到承重負荷,減少關(guān)節間骨骼摩擦等作用。
前面我們講述過(guò)軟骨細胞的制備方法,但是在制備過(guò)程所使用的試劑有哪些,這你們知道嗎?我相信很多人都是不知道的。下面,欣潤生物就來(lái)詳細講述一二。
大鼠軟骨細胞制備過(guò)程中主要的試劑:
1、PBS:每袋加ddH2O定容至1000ml,調pH7.2,高壓滅菌消毒。
2、DMEM細胞生長(cháng)培養液:臨用前根據需要加10%胎牛血清,1%的ITS,按1%體積分數加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100U/mL和100U/mL,置于4℃冰箱保存。
3、抗生素:青霉素(80萬(wàn)U)和鏈霉素(100萬(wàn)U)在無(wú)菌操作臺內以高壓滅菌過(guò)的雙蒸水溶解(分別加入4ml滅菌水/青霉素,5ml滅菌水/鏈霉素),配制成20萬(wàn)u/ml分裝,置于-20℃冰箱保存,臨用時(shí)4℃解凍。
注意:盡量避免反復凍融,并使培養基濃度為100u/ml。
4、細胞凍存液:生長(cháng)培養基(含20%胎牛血清)或100%胎牛血清,加入10%的DMSO混合均勻,置于4℃冰箱保存。
注意:大鼠軟骨細胞接種后48H再換液,這樣細胞才帖牢不掉。第三、四天多觀(guān)察,細胞在會(huì )爆發(fā)式增殖。