可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
2)存活細胞,收到后應繼續生長(cháng),傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。
3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
二、細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養瓶的狀況,若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存,作為細胞需要售后時(shí)提供收到細胞時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3)觀(guān)察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
4)貼壁細胞:小鼠腦微血管內皮細胞在運輸過(guò)程中貼壁細胞會(huì )有脫落的現象,如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長(cháng),可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。
5)懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的*培養基)。