什么是
大鼠少突膠質(zhì)前體細胞的原代培養?嚴格地說(shuō)原代細胞培養是指從動(dòng)物機體取出的組織經(jīng)各種酶、螯合劑或機械方法處理,分散成單細胞,選用合適的培養基在體外進(jìn)行的首次培養,也叫初代培養。通常把一代至十代以?xún)鹊呐囵B細胞統稱(chēng)為原代細胞培養。
原代細胞培養主要包括取材→分離→培養等三部分。原代培養是建立各種細胞系的開(kāi)始,是實(shí)驗人員需掌握的一項基本技術(shù)。原代培養的細胞其生物學(xué)特性未發(fā)生很大變化,接近和能反映體內生長(cháng)特性,仍具有二倍體遺傳特性,因此適用于藥物敏感性試驗、細胞分化、細胞生長(cháng)代謝等實(shí)驗研究。
大鼠少突膠質(zhì)前體細胞取材應該注意什么?
動(dòng)物體內大部分的組織細胞都可以在體外培養,但其難易程度與組織類(lèi)型、分化程度、供體年齡、供體健康狀態(tài)、原代培養方式等有直接關(guān)系,也是決定原代培養成敗的關(guān)鍵。
因此原代取材我們應滿(mǎn)足以下要求:
1、取材時(shí)注意無(wú)菌操作,使用的手術(shù)器械、培養皿以及試劑都應保證無(wú)菌;
2、使用的手術(shù)器械應鋒利,使其在剪碎組織的時(shí)候盡可能減少對細胞的機械損傷;
3、對組織樣本帶有血液、脂肪、結締組織的,在處理組織時(shí)應盡可能去除這些非目的組織;
4、如無(wú)特殊要求,可采用更加容易培養的組織進(jìn)行培養,提高培養成功率;
5、取材過(guò)程盡量要快,保證組織新鮮;
6、原代培養應采用應用豐富的培養液,一般添加5%-20%胎牛血清;
7、對組織的來(lái)源、部位、取材時(shí)間、處理方法以及供體的一般情況都需做好記錄。