小鼠骨髓內皮祖細胞的鑒定方法

　　小鼠骨髓內皮祖細胞來(lái)源內皮祖細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。

　　成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(cháng)骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱(chēng)為紅骨髓。

　　小鼠骨髓來(lái)源內皮祖細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞培養基培養篩選制備而來(lái)。

　　小鼠骨髓內皮祖細胞的方法及其鑒定和生物學(xué)特性。方法：密度梯度離心法分離獲取小鼠骨髓單核細胞，培養于培養液中，每天于倒置顯微鏡下觀(guān)察EPC的形態(tài)。應用細胞免疫熒光法、流式細胞技術(shù)鑒定EPC表面抗原標志CD34、血管內皮生長(cháng)因子受體，熒光顯微鏡檢測EPC吞噬DiI標記的乙?；兔芏戎鞍准敖Y合FITC標記的荊豆凝集素功能。

　　注意事項

　　1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

　　2. 在細胞培養過(guò)程中，請注意保持無(wú)菌操作。

　　3. 傳代培養過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。