小鼠腦微血管內皮細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。
細胞可采用加入等量新鮮培養基后直接吹打分散進(jìn)行傳代，或用自然沉降法加入新培養基后再吹打分散進(jìn)行傳代。
實(shí)驗步驟：
?、?入無(wú)菌室之前用肥皂洗手，再用75% 的酒精擦拭消毒雙手；
?、?倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液37℃下預熱；
?、?超凈臺臺面應整潔，用75%酒精棉球擦拭清潔；
?、?打開(kāi)超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右，關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；
?、?點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管，巴士德吸管和刻度吸管，安上橡皮頭，過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內；
?、?將培養用液瓶口用75%酒精消毒，過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；
?、?倒掉培養細胞的舊培養基，洗去殘留的就培養基，或用少量胰酶涮洗一下。
小鼠腦微血管內皮細胞培養步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養基后吹勻。
更新時(shí)間：2020-07-20
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