小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。
目前常用的分離方法有全骨髓法和密度梯度離心法,全骨髓法即根據干細胞貼壁特性,定期換液除去不貼壁細胞,從而達到純化MSC的目的;密度梯度離心法即根據骨髓中細胞成分比重的不同,提取單核細胞進(jìn)行貼壁培養。
隨著(zhù)對表面抗原認識的深入,有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進(jìn)行分離純化,但經(jīng)過(guò)流式或磁珠分選后的細胞出現了增殖緩慢等一些問(wèn)題,加之耗費較大和技術(shù)的難度,在某種程度上限制了這些方法的廣泛應用。
培養的意義
1.有利于進(jìn)行骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學(xué)特性的研究。
2.為下一步的傳代培養創(chuàng )造條件。
3.可以直接應用與臨床實(shí)踐,是研究小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞作用的前提。
此法的優(yōu)點(diǎn)是:
?、俜蛛x效果好,可一次獲得較純顆粒;
?、谶m應范圍廣,能像差速離心法一樣分離具有沉降系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;
?、垲w粒不會(huì )擠壓變形,能保持顆?;钚?,并防止已形成的區帶由于對流而引起混合。