小鼠心肌細胞根據其生理功能可分為兩類(lèi),即工作性心肌細胞和傳導性心肌細胞。其中工作性心肌細胞構成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導和收縮的功能;而自律性心肌細胞組成心臟的傳導系統,包括竇房結、結間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網(wǎng)。
小鼠心肌細胞操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
更新時(shí)間：2022-06-23
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