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        小鼠破骨細胞的使用方法和注意事項

        更新時(shí)間:2021-08-25點(diǎn)擊次數:1210
          小鼠破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,位于骨組織表面的淺凹處,破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統,其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。
               破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化,是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養且存活時(shí)間較短。
          小鼠破骨細胞分離自骨組織和骨髓;破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統,其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化,因此多數學(xué)者從破骨細胞著(zhù)手研究破骨細胞的結構、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養且存活時(shí)間較短。
          一、使用方法:
          1、小鼠破骨細胞是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養且存活時(shí)間較短;建議您收到細胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗,此細胞不建議傳代。取出細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態(tài)。
          2、細胞消化
          1) 吸出細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
          2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養基終止消化;
          3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
          4) 待細胞*貼壁后,培養觀(guān)察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
          二、注意事項:
          1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
          2. 在細胞培養過(guò)程中,請注意保持無(wú)菌操作。
          3. 傳代培養過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),否則會(huì )影響細胞貼壁及其生長(cháng)狀態(tài)。
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